Abstract INTRODUCTION: Chagas disease surveillance requires current knowledge on synanthropic triatomines. We analyzed the occurrence and Trypanosoma cruzi infection rates of triatomine bugs in central Brazil, during 2012-2014. METHODS: Triatomines were collected inside or around houses, and T. cruzi infection was determined by optical microscopy and conventional/quantitative polymerase chain reaction. RESULTS: Of the 2706 triatomines collected, Triatoma sordida was the most frequent species in Goiás State, whereas Panstrongylus megistus predominated in the Federal District. Parasites identified were T. cruzi, T. rangeli, and Blastocrithidia sp. CONCLUSIONS: P. megistus and T. sordida sustained the risk of T. cruzi transmission to humans in central Brazil.

In the present work, we investigated whether it is possible to detect morphometric changes in Rhodnius neglectus Lent, 1954 (a candidate vector of Chagas disease in Central Brazil) populations in the transition from sylvatic to laboratory conditions. We analyzed size and shape variation in wings of sylvatic parents and their laboratory descendents (first, third and fifth generations) using geometric morphometric techniques. Sexual size dimorphism and shape of wings were maintained, but wing size decreased from sylvatic specimens to their laboratory generations. Size variation in R. neglectus should reflect the expected morphometric changes between sylvatic and domestic populations and can be applied to analyze the level of adaptation of R. neglectus to domestic habitats. This information might be useful to detect persistent infestations in dwellings after insecticide application, or new infestations from the sylvatic environment, and is therefore important to guide vector surveillance strategies for Chagas disease.

INTRODUÇÃO: A competência vetorial de triatomíneos é determinada a partir de estudos sobre biologia e comportamento alimentar em condições de campo e/ou laboratório. Fatores como número de picadas, quantidade de sangue ingerido e tempo de defecação têm implicações na transmissão de tripanosomatídeos. Parâmetros biológicos e comportamentais de Rhodnius neglectus e R. robustus foram comparados experimentalmente para estimar diferenças no potencial de transmissão de tripanosomatídeos. MÉTODOS: Os triatomíneos foram observados diariamente para determinar o período de desenvolvimento ninfal, mortalidade, detecção da fonte alimentar, número de picadas, tempo do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, tempo entre o final do repasto e a primeira defecação e frequência de defecação. RESULTADOS: Apesar do período ninfal de R. neglectus (156,4 ± 25,05d) ter sido menor que o de R. robustus (204,7 ± 13,22d), a mortalidade foi similar entre as espécies (63,8 e 65%, respectivamente). R. robustus e R. neglectus detectaram rapidamente a fonte alimentar, especialmente no primeiro estádio (2,5 e 1,6min, respectivamente). Apesar do tempo de repasto sanguíneo ter sido similar entre as espécies, R. robustus ingeriu em média uma maior quantidade de sangue em todos os estádios, com maiores valores para as ninfas V. As ninfas de R. neglectus picaram mais vezes as fontes alimentares, defecaram mais rápido e mais frequentemente que as de R. robustus. CONCLUSÕES: Sob as condições de laboratório usadas, R. neglectus possui um maior potencial para transmissão de Trypanosoma cruzi e T. rangeli que R. robustus, atributo que deve ser avaliado em infecções experimentais.

INTRODUCTION: The vector competence of triatomine insects is determined by studying their biology and feeding behavior under field and/or laboratory conditions. Factors including the number of bites, the amount of blood ingested and defecation time have implications for trypanosome transmission. The biological and behavioral parameters of Rhodnius neglectus and R. robustus were compared under experimental conditions to estimate differences in the potential transmission of trypanosomes. METHODS: The insects were observed daily to determine the period of nymphal development, mortality, detection of food source, number of bites, time of blood meal intake, amount of blood ingested, time elapsed between the end of the meal and the first defecation and the frequency of defecation. RESULTS: Although the nymphal development of R. neglectus (156.4 ± 25.05d) was lower than that of R. robustus (204.7 ± 13.22d), the mortality between species was similar (63.8 and 65% respectively).R. robustus and R. neglectus quickly located the food source, especially in the first instar (2.5 and 1.6 min, respectively). Although the time of blood meal intake was similar between the species, R. robustus ingested a larger amount of blood on average at all stages and exhibited higher values for the fifth instar. Nymphs of R. neglectus bit more frequently, and they defecated faster and more often than those of R. robustus. CONCLUSIONS: Under laboratory conditions, R. neglectus has a greater potential for transmission of Trypanosoma cruzi and T. rangeli than does R. robustus, an attribute that should be further evaluated in experimental infections.

Psammolestes tertius Lent & Jurberg, 1965 is a sylvatic triatomine bug species that occurs in thornbird nests in Brazil. We studied infestation of 527 nests of Phacellodomus rufifrons Wied, 1821 and Phacellodomus ruber Vieillot, 1817 by P. tertius in eight Brazilian states across the Cerrado and Caatinga ecoregions. Psammolestes tertius occurred in 44% of the nests, mainly in those of P. ruber. Overall, 3,261 specimens (52% nymphs) were captured, with an average of 14 bugs per infested nest (range 1-75). While P. tertius occurrence and age structure (percentage of nymphs) were similar in Cerrado and Caatinga nests, infestation intensity (bugs/infested nest) was higher in the Cerrado. Last-stage nymphs and adults were predominant in P. tertius populations from both P. ruber and P. rufifrons nests. The results indicate that Phacellodomus nests are favourable habitats for P. tertius in the open/dry ecoregions of Brazil. The percentage of adult P. tertius specimens (48%) was higher than that observed in other triatomine species (usually less than 5% under either experimental or natural conditions), suggesting that adult bugs tend to remain in thornbird nests. The stable blood supply provided by resident/breeding birds would favor steady P. tertius infestation of thornbird nests across Brazilian Cerrado and Caatinga ecoregions.

Panstrongylus rufotuberculatus is widely distributed in Central and South America. In Peru, it has been found in Tumbes, Piura, and Cuzco. The authors report the presence of P. rufotuberculatus in Chirinos-La Pareja, Suyo district, Ayabaca Province, Piura Region, Peru. Twenty-eight specimens were collected in two of 15 dwellings: three 2nd instar, four 3rd instar, two 4th instar, and eight 5th instar nymphs, three male and eight female, in an intra-domiciliary colony of guinea pigs (Cavia porcellus, raised indoors as a source of diet protein) and beds and bedroom walls. None of the fecal samples were naturally infected with Trypanosoma cruzi. This is the first report of synanthropic presence of P. rufotuberculatus in the region. The finding emphasizes the need for careful entomological and epidemiological surveillance of this and other triatomine species in the Region.

Panstrongylus rufotuberculatus presenta una amplia distribución en América Central y del Sur con un comportamiento de especie silvestre. En el Perú ha sido registrado en Tumbes, Piura y Cuzco, siendo descrito en casas de localidades de este último departamento. En el presente trabajo se documenta evidencia de domiciliación de P. rufotuberculatus en la localidad de Chirinos-La Pareja, Distrito de Suyo, Provincia de Ayabaca, Región Piura, Perú (4º46'S, 79º93'W). Se capturaron 28 especímenes: 3 ninfas II, 4 ninfas III, 2 ninfas IV, 8 ninfas V, 3 machos y 8 hembras, lo que evidencia la existencia de una colonia intradomiciliar en "cuyeros" (criaderos de Cavia porcellus) camas y paredes del dormitorio de la vivienda. Exámenes parasitológicos de heces evacuadas espontáneamente fueron negativos a infección natural por Trypanosoma cruzi. A pesar de que se ha reportado la presencia de P. rufotuberculatus en localidades de Tumbes y Piura, es la primera vez que se documenta su tendencia sinantrópica en la Región. La importancia de esta especie y posteriores investigaciones permitirán evaluar su etología y potencial vectorial de trypanosomiasis americana. Se recomienda una cuidadosa actividad de vigilancia entomo-epidemiológica para esta especie y las otras que coexisten simpátricamente, actualmente en esta región del norte de Perú.

Panstrongylus rufotuberculatus is widely distributed in Central and South America. In Peru, it has been found in Tumbes, Piura, and Cuzco. The authors report the presence of P. rufotuberculatus in Chirinos-La Pareja, Suyo district, Ayabaca Province, Piura Region, Peru. Twenty-eight specimens were collected in two of 15 dwellings: three 2nd instar, four 3rd instar, two 4th instar, and eight 5th instar nymphs, three male and eight female, in an intra-domiciliary colony of guinea pigs (Cavia porcellus, raised indoors as a source of diet protein) and beds and bedroom walls. None of the fecal samples were naturally infected with Trypanosoma cruzi. This is the first report of synanthropic presence of P. rufotuberculatus in the region. The finding emphasizes the need for careful entomological and epidemiological surveillance of this and other triatomine species in the Region.

Panstrongylus rufotuberculatus presenta una amplia distribución en América Central y del Sur con un comportamiento de especie silvestre. En el Perú ha sido registrado en Tumbes, Piura y Cuzco, siendo descrito en casas de localidades de este último departamento. En el presente trabajo se documenta evidencia de domiciliación de P. rufotuberculatus en la localidad de Chirinos-La Pareja, Distrito de Suyo, Provincia de Ayabaca, Región Piura, Perú (4º46'S, 79º93'W). Se capturaron 28 especímenes: 3 ninfas II, 4 ninfas III, 2 ninfas IV, 8 ninfas V, 3 machos y 8 hembras, lo que evidencia la existencia de una colonia intradomiciliar en "cuyeros" (criaderos de Cavia porcellus) camas y paredes del dormitorio de la vivienda. Exámenes parasitológicos de heces evacuadas espontáneamente fueron negativos a infección natural por Trypanosoma cruzi. A pesar de que se ha reportado la presencia de P. rufotuberculatus en localidades de Tumbes y Piura, es la primera vez que se documenta su tendencia sinantrópica en la Región. La importancia de esta especie y posteriores investigaciones permitirán evaluar su etología y potencial vectorial de trypanosomiasis americana. Se recomienda una cuidadosa actividad de vigilancia entomo-epidemiológica para esta especie y las otras que coexisten simpátricamente, actualmente en esta región del norte de Perú.

Rhodnius neglectus Lent, 1954 {Rn}e Psammolestes tertius Lent & Jurberg, 1965 {Pt} são triatomíneos que ocorrem em ninhos de aves, principalmente da família Furnariidae. O ciclo biológico dessas espécies é conhecido em condições de laboratório, sendo poucos estudos em ecótopos silvestres. Para analisar a infestação e estrutura de populações de Rn e Pt em ninhos de aves presentes na palmeira Mauritia flexuosa Linnaeus, em duas estações climáticas do Brasil Central, foram amostradas 41 palmeiras com evidências de nidificação de Phacellodomus ruber Vieillot, 1817 (22 na estação chuvosa e 19 na estação seca) em quatro áreas do Distrito Federal. Os insetos foram capturados usando-se coleta manual na copa da palmeira, identificados morfologicamente, separados por sexo e estádio ninfal. Fezes e glândulas salivares de Rn foram examinadas para verificar infecção por Trypanosoma cruzi Chagas, 1909 e/ou T. rangeli Tejera, 1920. Trinta e cinco palmeiras com ninhos de P. ruber estavam infestadas por Rn (85%) e 22 por Pt (53%). 442 indivíduos foram coletados na estação seca (200 Rn e 242 Pt) e 267 na estação chuvosa (136 Rn e 131 Pt). O único fator relacionado significativamente com a densidade de triatomíneos nas palmeiras foi a área. A estrutura etária das populações mostrou: a) maior abundância de adultos nas populações de Pt, b) maior abundância de machos em ambas as espécies e c) presença de fêmeas ovipondo em ambas as estações. Nenhum dos 177 triatomíneos examinados estava infectado por T. cruzi ou T. rangeli. A estrutura etária das populações de Rn e Pt não diferiu significativamente entre as estações amostradas, indicando ausência de marcada sazonalidade para essas espécies.

Rhodnius neglectus Lent, 1954 {Rn}and Psammolestes tertius Lent & Jurberg, 1965 {Pt} are triatomines that occur in bird nests, mainly furnarid nests. Their biological cycles are known in laboratory conditions and few studies were done in wild ecotopes. To analyze the infestation and population structure of Rn and Pt in bird nests on Mauritia flexuosa Linnaeus palm trees in two climatic seasons we sampled 41 palm trees with Phacellodomus ruber Vieillot, 1817 nests (22 in the wet season and 19 in the dry season) in four areas of Distrito Federal. The insects were collected by manual capture in the crown of palms, identified, separated by sex and immature stages. Faeces and salivary glands of Rn were examined to verify Trypanosoma cruzi Chagas, 1909 and/or T. rangeli Tejera, 1920 infection. Thirty five palm trees with P. ruber nests were infested by Rn (85%) and 22 by Pt (53%). 442 insects were collected in the dry season (200 Rn and 242 Pt) and 267 in the wet season (136 Rn and 131 Pt). The area was the only factor related with triatomine density in palm trees. The population structure showed: a) higher abundance of adults in Pt populations, b) higher abundance of males in both species and, c) females laying eggs in both seasons. Within the 177 insects examined none was infected by T. cruzi or T. rangeli. The population structure of Rn and Pt were not significantly different in the wet and the dry season, suggesting no seasonality reproduction.

Introducción. Trypanosoma rangeli es la segunda especie de tripanosoma que infecta al hombre en América Latina. Se ha observado variabilidad en las características biológicas, bioquímicas y moleculares en diferentes aislamientos de este parásito. Objetivo. Estudiar las características morfológicas y moleculares de cepas de T. rangeli aisladas de diferentes especies de Rhodnius e inoculadas en diferentes especies de vertebrados. Materiales y métodos. Se utilizaron 19 cepas de T. rangeli aisladas de R. prolixus, R. pallescens y R. colombiensis en Colombia, R. ecuadoriensis en Perú y R. pallescens en Panamá. Se evaluó el polimorfismo de los tripomastigotes sanguíneos en ratones ICR y se estudió el pleomorfismo de la cepa P53 de T. rangeli KP1(-) inoculada en ratón, marsupial y canino. Se efectuó análisis de ADN polimorfo amplificado aleatorio en 12 cepas aisladas de cuatro especies de Rhodnius. Resultados. Se observaron tres grupos discretos en la longitud total de los tripomastigotes sanguíneos y la cepa P53 presentó diferencias significativas en el tamaño de los tripomastigotes sanguíneos en ratón, marsupial y canino. El análisis de ADN polimorfo amplificado aleatorio mostró segregación de las cepas en dos ramas correspondientes a las cepas de T. rangeli KP1(+) y T. rangeli KP1(-). De otra parte todos las cepas de T. rangeli KP1(-) se agruparon de acuerdo con las especies de Rhodnius de las cuales fueron aisladas. Conclusión. Este es el primer estudio que revela una estrecha asociación entre cepas de T. rangeli y las especies de Rhodnius, confirmando que cada especie de Rhodnius transmite al hospedero vertebrado poblaciones del parásito con claras diferencias fenotípicas y genotípicas, lo cual soporta la evolución clonal de estas poblaciones.

O Distrito Federal (DF) do Brasil está localizado no bioma Cerrado, um complexo de fisionomias savânicas incluindo matas de galeria e campos úmidos permanentes (veredas). Triatomíneos silvestres infectados por Trypanosoma cruzi ocorrem na área, mas a transmissão enzoótica de tripanossomatídeos permanece insuficientemente caracterizada. Um estudo parasitológico envolvendo triatomíneos silvestres (166 Rhodnius neglectus coletados em palmeiras da espécie Mauritia flexuosa) e pequenos mamíferos (98 marsupiais e 70 roedores, totalizando 18 espécies) foi conduzido em 18 áreas, principalmente matas de galeria e veredas. Os parasitas foram isolados, identificados morfologicamente e caracterizados por PCR do DNA do cinetoplasto (kDNA) e núcleo (gene mini-exon). Seis R. neglectus, sete Didelphis albiventris e um Akodon cursor estavam infectados por tripanossomatídeos; a infecção em reservatórios silvestres é documentada pela primeira vez no DF. O PCR do kDNA detectou T. cruzi em cinco R. neglectus e o PCR do gene mini-exon revelou T. cruzi I nos isolados de D. albiventris. Um dos insetos mostrou estar infectado por T. rangeli KP1+. Apesar da ocorrência de D. albiventris (um importante reservatório silvestre e peridoméstico) e R. neglectus (um vetor secundário capaz de invadir domicílios) infectados por T. cruzi, um baixo risco de transmissão da doença de Chagas humana seria esperado no DF, considerando a baixa prevalência da infecção apresentada neste trabalho. A evidência molecular apresentada neste trabalho confirma a circulação de T. rangeli KP1+ com R. neglectus como vetor, amplia a distribuição geográfica deste parasita no Brasil e reforça a hipótese de adaptação de populações de T. rangeli (KP1+ e KP1-) a diferentes linhagens evolutivas de espécies de Rhodnius.

The Federal District of Brazil (DF) lies within the Cerrado biome, where open shrubland (savannas) is interspersed with riverside gallery forests and permanent swamps (veredas). Trypanosoma cruzi-infected native triatomines occur in the area, but the enzootic transmission of trypanosomatids remains poorly characterized. A parasitological survey involving sylvatic triatomines (166 Rhodnius neglectus collected from Mauritia flexuosa palms) and small mammals (98 marsupials and 70 rodents, totaling 18 species) was conducted in 18 sites (mainly gallery forests and veredas) of the DF. Parasites were isolated, morphologically identified, and characterized by PCR of nuclear (mini-exon gene) and kinetoplast DNA (kDNA). Six R. neglectus, seven Didelphis albiventris and one Akodon cursor were infected by trypanosomes; wild reservoir infection is documented for the first time in the DF. kDNA PCR detected T. cruzi in five R. neglectus and mini-exon gene PCR revealed T. cruzi I in isolates from D. albiventris. Parasites infecting one bug yielded T. rangeli KP1+ kDNA amplicons. In spite of the occurrence of T. cruzi-infected D. albiventris (an important wild and peridomestic reservoir) and R. neglectus (a secondary vector displaying synanthropic behavior), a low-risk of human Chagas disease transmission could be expected in the DF, considering the low prevalence infection recorded in this work. The detection of T. rangeli KP1+ associated with R. neglectus in the DF widens the known range of this parasite in Brazil and reinforces the hypothesis of adaptation of T. rangeli populations (KP1+ and KP1-) to distinct evolutionary Rhodnius lineages.

Para determinar e analisar a distribuição espacial de populações silvestres de triatomíneos no Distrito Federal, Brasil, foram amostradas 150 palmeiras da espécie Mauritia flexuosa em seis veredas de diferentes paisagens (silvestre, rural e periurbana) na estação chuvosa. Os triatomíneos foram identificados morfologicamente, separados por sexo e estadio ninfal e examinados para verificar infecção por Trypanosoma cruzi e Trypanosoma rangeli. Vinte e oito (18,6%) palmeiras estavam infestadas por Rhodnius neglectus e 14 (9,5%) por Psammolestes tertius. A freqüência dessas espécies em palmeiras com e sem ninhos foi significativamente diferente, sendo superior nas palmeiras com ninhos de aves e mamíferos na copa. O maior número médio de insetos/palmeira foi observado nas áreas rurais, com estimativas de até 838 insetos/hectare. A composição etária das espécies apresentou um padrão diferente, Rhodnius neglectus com predomínio de ninfas e Psammolestes tertius com predomínio de adultos, sendo que muitos ovos de Rhodnius neglectus foram coletados indicando um evento reprodutivo em fevereiro de 2003. Entre os ninhos encontrados nas palmeiras, o do pássaro Phacellodomus ruber (Furnariidae) apresentou as maiores abundâncias de triatomíneos, ocorrendo em 42% das palmeiras. A abundância relativa de Rhodnius neglectus e Psammolestes tertius foi maior em áreas rurais que possuíram maior número de ninhos nas palmeiras e menor densidade de palmeiras por hectare. Nenhum dos 96 triatomíneos examinados estava infectado por Trypanosoma cruzi ou Trypanosoma rangeli, apesar de encontrarmos infecção de Rhodnius neglectus por esses parasitas em estudos anteriores.

To determine and analyze the distribution of Triatominae sylvatic populations in the Federal District of Brazil, 150 Mauritia flexuosa palm trees were sampled in six veredas of different landscapes (sylvatic, rural and peri-urban) in the rainy season. Triatomines were morphologically identified and grouped by sex and nymphal stage and were examined to verify infection by Trypanosoma cruzi and Trypanosoma rangeli. Twenty eight (18.6%) palm trees were infested by Rhodnius neglectus and fourteen (9.5%) by Psammolestes tertius. The frequency of Triatominae in palm trees with and without nests was significantly different being higher in palm trees with bird and mammal nests in the crown. The higher average number of insects/palm tree was observed in rural areas with estimates of up to 838 insects/hectare. The species age makeup presented a different pattern, with nymphs predominant for Rhodnius neglectus and adults predominant for Psammolestes tertius. Also, many Rhodnius neglectus eggs were collected, which indicates a reproductive event in February 2003. Among the nests found in palm trees, that of the Phacellodomus ruber (Furnariidae) bird had the greatest abundance of Triatominae, occurring on 42% of palm trees. The relative abundance of Rhodnius neglectus and Psammolestes tertius was greater in rural areas which contained higher number of nests in palm trees and lesser density of palms per hectare. None of the 96 triatomines examined were infected by Trypanosoma cruzi or Trypanosoma rangeli, despite our finding of Rhodnius neglectus infection by those parasites in former studies.

A detecção de infestações domiciliares por triatomíneos é fundamental no desenvolvimento de estratégias de controle. Como parte de um estudo amplo sobre triatomíneos vetores de tripanossomatídeos no norte do Peru testamos a aplicação de dois métodos passivos de detecção de infestações intradomiciliares por Rhodnius ecuadoriensis: (i) a caixa de Gómez Núñez (GN) e (ii) folhas de papel. Um método de captura manual também foi empregado. Realizamos o estudo no vale Alto Chicama, Província de Gran Chimú, Departamento de La Liberdad, uma área de baixa infestação domiciliar. A metodologia consistiu inicialmente em procurar ativamente os triatomíneos em todas as casas por captura manual (homem/hora). Posteriormente, instalamos simultaneamente pares de caixas de Gómez Núñez e folhas de papel nos quartos de 207 casas, distribuídas em 19 áreas e monitoradas após dois, quatro e seis meses. A infecção por Trypanosoma rangeli e/ou T. cruzi foi investigada em duas casas com altos índices de infestação por R. ecuadoriensis. 16,9% das 207 casas investigadas pelo método de captura manual estavam infestadas por R. ecuadoriensis. A proporção de casas infestadas variou de 6,2 a 55,5% nas 19 áreas estudadas. A infecção natural por T. rangeli foi observada em R. ecuadoriensis coletados em duas casas, com taxas de infecção de 16,6 a 21,7%, respectivamente. O fato mais interessante foi a taxa de infecção de glândulas salivares variando de 7,4 a 8,3%. Após seis meses, quando os resultados da comparação entre os dois métodos passivos foram analisados, obtivemos 31,4% das caixas de Gomez Nuñez positivas, resultado quase duas vezes superior ao das folhas de papel (15,9%). Os três métodos somados detectaram infestação em 129 das 207 casas estudadas (62,3%) nas 19 áreas estudadas. O número de casas infestadas variou de 6,7% a 92,9%. Não observamos diferenças na positividade das folhas de papel e captura manual. Em áreas com baixas taxas de infestação, a metodologia usada neste estudo parece ser a melhor escolha em pesquisas de populações domésticas de R. ecuadoriensis.

Two passive methods in the assessment of intradomiciliary infestation by Rhodnius ecuadoriensis were tested: (i) the Gomes Nuñez sensor box (GN), (ii) sheets of white typing paper and (iii) one active timed manual method. The study was carried out in the Alto Chicama River Valley, Province of Gran Chimú, Department of La Libertad. The study design consisted of an initial searching of triatomines inside of the domestic environment by the manual capture active procedure (man/hour) covering all the studied houses. Then, matched pairs of GN boxes and paper sheets were simultaneously installed in the bedrooms of 207 households distributed in 19 localities. A comparative prospective trial of these passive detection devices were monitored at 2, 4 and, finally 6 months follow-up. Parasitological Trypanosoma rangeli and/or T. cruzi infections were investigated in two houses with high level of infestation by R. ecuadoriensis. 16.9% of the 207 households investigated by an initial active manual method were infested with R. ecuadoriensis. The proportion of infested houses fluctuated from 6.2 to 55.5% amongst the 19 localities investigated. T. rangeli natural infection was detected in R. ecuadoriensis specimens collected in two households. Parasite rates in the bugs ranged from 16.6 to 21.7% respectively. The most striking fact was an average rate of salivary gland infection ranging from 7.4 to 8.3%. At the end of the sixth month period, a cumulative incidence of 31.4% of positive GN boxes against 15.9% for paper sheets was recorded. All three methods combined detected domestic infestation in 129 (62.3%) of the 207 houses studied in the 19 localities. The range of houses infested varies from 6.7% to 92.9%. In areas with low bug density infestation rates, the methodology experienced in our studies, seems to be the best choice for investigations on domestic R. ecuadoriensis populations.

FUNDAMENTOS: O PCR tem alta sensibilidade no diagnóstico da LTA, mas é caro e distante da prática. A cultura e o esfregaço são práticos, mas pouco sensíveis. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi comparar os dois últimos métodos, buscando maior sensibilidade e menor custo. MÉTODOS:Foram comparados três meios de cultura no isolamento de leishmânia: Difco agar sangue + Schneider + soro bovino fetal (20%); Difco agar sangue + Schneider + urina humana (2%); Schneider + urina humana (2%). Foram comparadas, também, duas técnicas de pesquisa de amastigotas: esfregaço realizado com biópsia, ou raspado através de palito (matchstick). RESULTADOS: Os índices de positividade e contaminação (29 a 33% e 8 a 11%, respectivamente, p>0.05) foram semelhantes na comparação dos cultivos. Os esfregaços com biópsia, ou palito também não tiveram diferenças significativas (14 e 19%, respectivamente, p> 0,05). A Leishmania (Viannia) braziliensis predominou. CONCLUSÃO: No Brasil, a urina pode substituir o soro fetal bovino. Há vantagem na relação custo/benefício. A urina não tem custo enquanto 500ml de soro bovino fetal custa 185 dólares.

BACKGROUND: PCR is a highly sensitive procedure for the diagnosis of LTA, but it is expensive and not readily available. Culture and smearing are practical, but they lack sensitivity. OBJECTIVE: The objective of this work is to compare the latter two methods in order to achieve a higher sensitivity at a lower cost. METHOD: Three culture media were compared in the process of isolating leishmaniasis: blood Agar Difco + Schneider + 20% fetal calf serum; Difco + Schneider + human sterile urine (2%); Schneider with sterile human urine (2%). Moreover, two techniques were compared for the demonstration of amastigotes: biopsy performed with smears, or matchstick scrapping RESULTS: The positivity and contamination indices (29-to-33% and 8-to-11%, respectively, p>0.05) were similar when comparing the cultures. The smears carried out by biopsy or the matchstick scrapping procedure had no significant differences (14 and 19%, respectively, p>0.05). Leishmania (Viannia) braziliensis predominated. CONCLUSION: In Brazil, urine may substitute fetal calf serum. The cost-to-benefit ratio is advantageous. Urine has no cost, while the market value of 500 ml of fetal calf serum is $US 185.

Information on the distribution and synanthropic behaviour of triatomines is essential for Chagas disease vector control. This work summarises such information from northern Peru, and presents new data on Rhodnius ecuadoriensis - an important local vector infesting 10-35% of dwellings in some zones. Three species are strongly synanthropic and may be suitable targets for chemical control of domestic/peridomestic bug populations. Panstrongylus herreri, the main domestic vector in the area, is probably present in sylvatic ecotopes in the Marañón river system. R. ecuadoriensis and Triatoma dimidiata seem exclusively domestic; biogeographical and ecological data suggest they might have spread in association with humans in northern Peru. Confirmation of this hypothesis would result in a local eradication strategy being recommended. Presence of trypanosome natural infection was assessed in 257 R. ecuadoriensis; Trypanosoma rangeli was detected in 4% of bugs. Six further triatomine species are potential disease vectors in the region (T. carrioni, P. chinai, P. rufotuberculatus, P. geniculatus, R. pictipes, and R. robustus), whilst Eratyrus mucronatus, E. cuspidatus, Cavernicola pilosa, Hermanlentia matsunoi, and Belminus peruvianus have little or no epidemiological significance. A strong community-based entomological surveillance system and collaboration with Ecuadorian public health authorities and researchers are recommended.

Chagas disease control strategies strongly depend on the triatomine vector species involved in Trypanosoma cruzi transmission within each area. Here we report the results of the identification of specimens belonging to various species of Triatominae captured in Ecuador (15 species from 17 provinces) and deposited in the entomological collections of the Catholic University of Ecuador (Quito), Instituto Oswaldo Cruz (Brazil), the Natural History Museum London (UK), the London School of Hygiene and Tropical Medicine (UK), the National Institute of Hygiene (Quito), and the Vozandes Hospital (Quito). A critical review of published information and new field records are presented. We analysed these data in relation to the life zones where triatomines occur (11 life zones, excluding those over 2,200 m altitude), and provide biogeographical maps for each species. These records are discussed in terms of epidemiological significance and design of control strategies. Findings relevant to the control of the main vector species are emphasised. Different lines of evidence suggest that Triatoma dimidiata is not native to Ecuador-Peru, and that synanthropic populations of Rhodnius ecuadoriensis in southern Ecuador-northern Peru might be isolated from their sylvatic conspecifics. Local eradication of T. dimidiata and these R. ecuadoriensis populations might therefore be attainable. However, the presence of a wide variety of native species indicates the necessity for a strong longitudinal surveillance system.

Direct or indirect demonstration of Leishmania in pathological samples still constitutes a critical challenge when it comes to the parasitological diagnosis of this protozoose. In spite of significant and novel advances in the field of molecular biology of Leishmania, many of the techniques with a real potential diagnostic application, still continue to be the tools for laboratory scientific investigation. Few methods are in the stage of clinical and epidemiological application in endemic areas. Being optimistic, very few techniques would be available at public health laboratories in the next decade in developing countries, where these parasites are prevalent. Meanwhile, we will have to continue to rely on the so called classical methods of Basic Protozoology, which under the supervision of experienced professionals will provide a diagnosis for the great majority of the cases. This overview identifies the methods recommended by experts in this field, it also describes the procedures widely recognized by its sensitiveness and reproducibility, and it demonstrates that these methods will continue to be used if they are appropriately performed.

La demostración directa o indirecta de Leishmania en las muestras patológicas continúa siendo un importante desafío en el diagnóstico parasitológico de esta protozoosis. A pesar de los avances significativos surgidos en investigaciones de biología molecular, muchas de sus técnicas con potencial aplicación diagnóstica, continúan siendo solamente herramientas de los laboratorios de investigación científica. Pocas de ellas se encuentran en fase de valorización clínica y epidemiológica en áreas endémicas, y quizás, de manera optimista, muy pocas estarían a disposición de los laboratorios de diagnóstico de salud pública en la próxima década. Mientras tanto, seguiremos contando con el auxilio de los llamados métodos clásicos de la Parasitología básica que todavía, en las manos de individuos experimentados, diagnostican la gran mayoría de los casos. Este artículo identifica los métodos recomendados por los especialistas del tema, describe los procedimientos consagrados por su sensibilidad y reproductibilidad, concluyendo que éstos continuarán vigentes, siempre que sean correctamente ejecutados.